پرتوهای فرابنفش موجب تشکیل گونه های فعال اکسیژن در پوست می گردد که هیدروژن پروکسید یکی از آنها است. پروکسیدها موجب تخریب لیپید، پروتئین و DNA در پوست می شوند. پروکسی شدن لیپیدهای غشاء پوست باعث تغییر سیالیت و قدرت مخابره-ای آنها و نتیجتاً تغییرات التهابی ، پیری زودرس پوست و رشد نامتقارن سلولها می گردد. پاسخ غشاء های سلولی به استرس های اکسیدانی را می توان با روش فلوسایتومتری اندازه گیری نمود. در این تکنیک از 5-دو دکانوئیل آمینو فلورسین (C11-fluor)، یکی از مشتقات سبز رنگ لیپوفیل فلورسین، به عنوان پروب استفاده می شود. این ماده به علت ماهیت چربی دوستش به راحتی وارد غشاء سلول می گردد. اکسیداسیون این ماده توسط گونه های واکنش پذیر لیپوفیلی مثل رادیکالهای لیپید پروکسیل سیگنالهای فلورسنت را نابود می نماید. شدت کاهش سیگنالهای فلورسانی شاخصی پویا برای فرایندهای اکسیدانی در غشاء سلول می باشد.


پروتکل: سلولهای کراتینوسیت انسان در یک محیط کشت ویژه ی عاری از سرم یک بار با ماده تحت آزمون (اگزوپی در غلظت 0.1%)، یک بار با آنتی اکسیدان سنتزی BHA درغلظت 50μM (به عنوان کنترل مثبت ) برای مدت 24 ساعت گرمخانه گذاری گردیدند. سپس ماده C11-fluor (پروب فلورسان لیپوفیلی ) وارد محیط کشت گردیده و پس از 45 دقیقه (زمان کافی برای ورود این ماده به غشاء سلولهای کراتینوسیت) با شستشو خارج گردید. اگزوپی و BHA مجدداً به محیط کشت اضافه شده، و سلولهای کراتینوسیت توسط پرتوهایUVB با شار 201 mJ/cm2 تحت چالش قرار گرفتند. پس از یک ساعت کشت مجدد، آبکشی و عمل آوری با آنزیم تریپسیناز انجام شد. خاصیت فلورسانی پروب با روش فلوسایتومتری برای تعداد مشخصی از سلول (1000 سلول) اندازه گیری شد. کاهش فلورسانی ، منعکس کننده اکسیدشدن پروب در اثر افزایش مقدار لیپیدهای پروکسیدشده در غشاء سلول می باشد. نتایج حاصل از آزمایش فلورسنس نشان دهنده محافظت غشاء سلولهای کراتینوسیت در برابر تشکیل رادیکال می باشد. مواجهه سلولها در برابر پرتوهای فرابنفش منجر به افزایش معنادار پروکسی شدن لیپید در سلولها می گردد. در همان شرایط، آنتی اکسیدان سنتزی BHA (کنترل مثبت ) پروکسی شدن لیپیدها را 76 درصد کاهش داد. همزمان، محافظت با اگزوپی میزان محافظت را 28 درصد افزایش داد. میزان محافظت متناسب با افزایش دوز افزایش می یابد.

نتیجه: اگزوپی به شکل معناداری از پروکسی شدن لیپیدهای غشاء سلولی پوست در اثر پرتوهای فرابنفش محافظت نموده و به این ترتیب از پیری پوست در اثر نور خورشید جلوگیری به عمل می آورد.